Las cuatro rutas de la Peregrinación Eucarística Nacional comenzaron desde todas las fronteras de los Estados Unidos el fin de semana del domingo de Pentecostés, iniciando lo que algunos han llamado la mayor procesión eucarística en la historia de Estados Unidos.
Según un informe de la Peregrinación Eucarística Nacional, la Ruta Mariana comenzó el 19 de mayo en el Parque Estatal Itasca en Minnesota, que contiene las cabeceras del río Mississippi. El obispo Andrew Cozzens de la Diócesis de Crookston, quien también es presidente de la junta del Congreso Eucarístico Nacional, celebró una misa de apertura al aire libre. También bendijo el río Mississippi y a los aproximadamente 2.000 peregrinos que se preparaban para comenzar la peregrinación.
En el sur, la Ruta de San Juan Diego se inició el 19 de mayo con una misa celebrada en la Catedral de la Inmaculada Concepción en Brownsville por el obispo local Daniel Flores. Mientras el obispo Cozzens habló sobre Pentecostés y el avivamiento, el obispo Flores reflexionó sobre el don de la Eucaristía en su homilía.
Hacia el este, la Ruta Santa Isabel Ana Seton comenzó el 18 de mayo en New Haven, Connecticut, en la iglesia donde está enterrado el Beato Michael McGivney, fundador de Caballeros de Colón. El Arzobispo Christopher Coyne de Hartford celebró una Misa extendida de Vigilia de Pentecostés, que condujo a una adoración eucarística que duró toda la noche y al inicio oficial de la peregrinación el 19 de mayo.
En San Francisco, la Ruta occidental de San Junípero Serra comenzó con una misa celebrada por el Arzobispo Salvatore Cordileone en la Catedral de Santa María de la Asunción, seguida de una procesión por San Francisco y el puente Golden Gate. Según el informe de la Romería Eucarística Nacional, a la inauguración de la Ruta de la Serra asistieron casi 4.000 peregrinos.